硅藻土吸附固定化Bacillus sp.DL-2胞内蛋白酶拆分制备(S)-乙酸苏合香酯

[目的](S)-乙酸苏合香酯是手性药物合成的关键手性砌块,其在多种手性化合物的合成及医药、香料的工业生产中具有重要的作用.传统的化学合成手性化合物的方法需要有毒有机溶剂及重金属的参与,对环境及人类具有严重的危害,同时得到的手性化合物的光学纯度较低.与传统的化学合成相比,酶法选择性拆分消旋体化合物,具有高立体专一性和区域选择性、副反应少、产率高、产物光学纯度好以及反应条件温和的优点,是一种被广泛认可的拆分方法.实验表明,Bacillus sp.DL-2胞内蛋白游离酶可拆分制备(S)-乙酸苏合香酯,然而游离酶不易回收且稳定性差,将Bacillus sp.DL-2胞内蛋白游离酶制备成固定化制剂,克服了游离酶对环境敏感,稳定性不高的缺点,为工业化生产(S)-乙酸苏合香酯奠定了基础.[方法]酶的固定化方法主要有物理吸附法、离子结合法、共价结合法、交联法和包埋法.以吸附法固定酶,酶的构象很少改变,因此,酶的催化活力损失较少;且吸附法固定化操作过程简单,因此吸附法在经济上是最具吸引力的固定化方法.硅藻土由硅藻的细胞壁沉积而成,硅藻土表面的多孔性与负电性使其呈现明显表面吸附性,因而被常用做吸附载体.以硅藻土作为固定化载体,对Bacillus sp.DL-2胞内蛋白酶进行固定化,用以拆分制备高光学纯的(S)-乙酸苏合香酯.利用单因素实验优化,确定制备固定化酶的最佳固定化条件及制备(S)-乙酸苏合香酯的最佳拆分条件,并测定了制备的固定化酶对金属离子的敏感度及储存稳定性.[结果]最佳固定化条件为:温度40℃,pH为7,固定化时间10 h,载体添加量100 g/L.在最佳固定化条件下制备了固定化酶,优化确定了制备(S)-乙酸苏合香酯的最佳拆分条件为:固定化酶用量为160 mg/mL,拆分时间7 h,拆分温度30℃,缓冲液pH为7.[结论]在最佳固定化及拆分条件下,制备的(S)-乙酸苏合香酯e.e.值可达到96.8％,转化率为73.9％,且固定化酶对金属离子敏感度较低,对反应环境要求较低,适用于工业化生产.固定化酶在4℃条件下储存,随保存周数的增加,e.e.值及转化率均逐渐降低,但4周后e.e.值仍能达到90.1％,转化率保持在66.6％左右,具备较高的储存稳定性,为工业化生产(S)-乙酸苏合香酯提供了参考.     

政策冲突的机理研究及应对策略 ——基于理性设计和非理性实践下的思考

政策在设计之初就具有理性特征,精准扶贫工作一方面为了实现脱贫攻坚的政治任务和民生目标,另一方面又要实现贫困治理与农村社会发展更好契合的价值追求.在理性设计方面,可从实践中看到精准扶贫工作实施体系之严密、程序之严谨、考核之严格以及动员之广泛等技术理性特征,这是保障精准扶贫工作实现其政治治理诉求与社会价值追求的制度性与技术性保障.在进入村庄实地调研后观察到精准扶贫政策在基层实践中的复杂样态,以及与政策设计预期相背离的诸多"非理性"现象.例如:权力运作环境的复杂性与权力中心的波及面的问题、家庭经济的不确定性与扶贫工作的保守性的问题、政策执行者的模糊理解和面临任务时间压力的问题、个体的本能私心和政策的公共属性的问题等.这些精准扶贫实践中"非理性"现象的碎片化感知,与政策的"理性设计"之间形成了明显的张力.     

湿地松引种家系的个体育种值评价

湿地松Pinus elliottii是引进树种,遗传基础变窄是高世代育种面临的严重问题,需要不断补充新的基因资源.研究对二十世纪90年代从美国引进的126个全同胞家系、32个自由授粉家系湿地松种子营建的基因资源林进行了生长量调查分析,结果显示,与一代种子园和改良种子园生产的子代相比,个体树高、胸径、材积的最大值和最小值均来自引进的子代群体,表明新引进群体包含更多的遗传变异;树高、胸径、材积的单株狭义遗传力范围分别为0.323-0.417、0.218～0.392、0.255～0.426,与其它报道范围一致,生长量性状受中等程度的遗传控制.使用个体模型分别计算全同胞家系、半同胞家系所有个体的育种值并以材积育种值为标准进行了排名,全同胞家系排名前30的个体集中在7个家系,半同胞家系排名前15的集中在5个家系,为保证更多的遗传多样性,从这12个家系中选择1～2个个体补充到新一轮的育种群体中,有效的拓宽现有湿地松育种群体的遗传背景.     

醋柴胡多糖VBCP-3的结构和抗炎作用研究

分离纯化醋柴胡多糖,分析其结构并探讨其对脂多糖诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7炎症反应的影响。用水提醇沉法提取醋柴胡粗多糖;Sevage法脱蛋白,再通过DEAE-Sepharose fast flow柱层析纯化得到醋柴胡精多糖,紫外扫描法和高效凝胶渗透色谱法测定精多糖的纯度及分子量,红外光谱法确定糖链上的官能团类型,GC-MS法测定单糖组成,MTT法测定精多糖对巨噬细胞RAW264.7存活率的影响,Griess试剂法测定精多糖对LPS诱导小鼠巨噬细胞的NO分泌量的影响。由此得到醋柴胡精多糖VBCP-3,VBCP-3为吡喃糖,不含蛋白质和核酸,分子质量为436.221 ku,其单糖组成为鼠李糖∶阿拉伯糖∶半乳糖∶葡萄糖=1.3∶24.9∶3.2∶1.00。VBCP-3对巨噬细胞RAW264.7无显著毒性。与模型组比较,VBCP-3能显著抑制NO的释放量(P0.01)。醋柴胡多糖VBCP-3是一种单糖组成丰富的杂多糖,具有一定的抗炎活性。     

国外农村产业融合发展政策解读及启示——以韩国六次产业为例

农村一二三产业融合发展能够更好地发展农业的多功能性,促进农村经济发展,活化农村地区,并可促进城乡互动和城乡融合.韩国的六次产业政策即是为促进农村地区产业更好地融合发展提出的.首先对韩国六次产业政策及发展情况等进行概述,然后对农村融复合产业示范区、推荐的农村融复合产业优秀案例及近2年农村融复合产业竞选比赛的获奖案例进行分析,以期对我国农村产业融合发展有所启发和借鉴.在此基础上,指出目前我国在农村产业融合方面存在法律制度和促进办法缺乏、产业融合模式创新和品牌化战略不足、地域特色缺乏、参与项目类型较单一及农村复合型人才短缺等问题,最终提出优化农村创业环境、培育产业融合主体、构建政策关联体系、做精做宽二三产业及加快优秀示范区建设等建议.     

广东南澳乌屿岛繁殖期褐翅燕鸥家域研究

广东南澳候鸟省级自然保护区的乌屿岛是中国南部沿海地区最大的褐翅燕鸥繁殖地,为确定褐翅燕鸥在繁殖地的家域范围,我们于2018年5月、2019年5月利用卫星追踪技术在乌屿岛开展了繁殖期褐翅燕鸥家域的研究。结果表明:褐翅燕鸥家域平均面积为(17346.29±31738.74)km²,家域范围西南至珠江口岛屿,北达福建省漳州市的外屿,东到台湾岛的台中至台南的西海岸;褐翅燕鸥家域形状均不规则,并存在重叠,重叠率最小为0.39%,最大为41.47%;褐翅燕鸥家域活动时间上午主要集中在5∶00—10∶00,下午主要集中在15∶00—19∶00;食物因素和觅食策略是影响褐翅燕鸥家域的主要因素。为进一步加强乌屿岛褐翅燕鸥的保护,建议将其家域集中分布区域纳入自然保护地中。     

非洲猪瘟疫情下规模化猪场人员与物资入场流程的建立

自2018年我国首次发生非洲猪瘟疫情以来,各规模化猪场纷纷进行了非洲猪瘟疫情防控策略的探索,总结出了适合中国国情、适合本地区本场实际情况的生物安全管理办法。当前非洲猪瘟疫情愈加严峻复杂,非洲猪瘟病毒毒株呈现出基因缺失株、自然变异株、自然弱毒株和强毒株并存的局面,且非洲猪瘟病毒的潜伏期延长、临床症状不明显、检出率降低,为非洲猪瘟的防控工作带来巨大困难和挑战。人员和物资进出猪场、人与猪群直接接触是将非洲猪瘟病毒带入生产区,并将其传播给猪的“最后一公里”。严格控制人员和物资入场是守好猪场生物安全的关键防线。建立科学、可操作性强、便于执行的生物安全流程依然是非洲猪瘟疫情防控的唯一途径。针对目前非洲猪瘟疫情的防控形势,建议根据各场实际情况,不断优化人员和物资入场流程,以达到防控的目的。     

YX106系杜洛克种猪有效精子数遗传改良

公猪在养猪生产中占据着最重要的位置，公猪的优秀遗传基因可通过精液快速传递到商品群中，从而快速获得效益。因此公猪精液的好坏关系着公猪的价值。在高成本的选育前提下，选育出1头精液品质优良的公猪具有重要的意义。研究将公猪精液品质指标加入到公猪选育性状中进行对比分析。研究结果表明：对公猪进行精液有效精子数选育可提高选育质量，正向促进公猪选育效果，提升种公猪利用效率。     

圈养华南虎血液生化指标正常参考值初步研究

以国内部分圈养的健康华南虎Panthera tigris amoyensis作为研究对象,通过收集华南虎血液生化报告和采集华南虎血液样本检测建立样本数据,血样检测采用自动血液生化分析仪干式试剂片生化技术测定,测定血液生化指标包括血糖(GLU)、总蛋白(TP)、总胆固醇(CHOL)、总胆红素(TBIL)、肌酐(CREA)等。得到华南虎血液生化共38项指标的正常参考值范围(95%概率),其中几项主要指标正常值范围如下:GLU(2.82-11.55)mmol/L、TP(56.58-85.93)g/L、CHOL(3.32-8.66)μmol/L、TBIL(0-5.30)μmol/L、CREA(52-349)μmol/L等。统计结果显示,雌雄华南虎间血液生化指标的部分项目有差异(P <0.05),幼龄组和成年组间各项生化指标差异不显著(P >0.05),与其他虎亚种相关血液生化报道的生化指标部分有差别。华南虎血液生化指标正常参考值范围不同于其他虎亚种,建立华南虎血液生化指标正常值对华南虎的饲养管理、疾病诊治预防和保育繁殖研究工作有重要作用。